2。2  材料、仪器与试剂源G于J优L尔V论N文M网WwW.youeRw.com 原文+QQ75201`8766

材料:新鲜淡水鱼(购于淮安市淮安区流均镇农贸市场)。

预处理:新鲜淡水鱼刮下鱼鳞,弃鱼肉取鱼鳞,用水洗净,称重,冷冻干燥,在冰箱中储藏备用。

仪器: LGJ-18S冷冻干燥机、傅里叶红外分光光度计。

试剂:鸟嘌呤为生物试剂,购于南京奥多福尼生物试剂有限公司。

2。3 鱼鳞中鸟嘌呤的提取方法与测定

称取适量2。2中处理过的鱼鳞,放入40℃以下的温水中浸泡并搅拌一定时间,用筛子过滤后取滤液,浓缩冷冻干燥。用0。35mol/L盐酸溶解冷冻干燥物,调节pH至6-6。5析出沉淀,去离子水洗涤3次,过滤后沉淀冷冻干燥,称重计算产率。鱼鳞渣洗净冷冻干燥,放入冰箱中备用。

冷冻干燥物通过傅里叶红外分光光度计进行表征,并与标准样品进行对比。

图2 鸟嘌呤提取工艺流程图

2。4结果与讨论

2。4。1鸟嘌呤提取率计算

称取冷冻干燥后鱼鳞共6。55g,冷冻干燥后的鸟嘌呤的质量为0。0524g,所以鸟嘌呤的提取率为0。8%。

2。4。2红外扫描结果

图3 冷冻干燥物与鸟嘌呤标样红外扫描图 

图2中试样即本次实验所提取的鸟嘌呤,标样为标准鸟嘌呤使用0。35mol/L盐酸溶解后,调节pH至6。4时析出的固体冷冻干燥后的产品。实验所提取的鸟嘌呤含有较多杂质,与纯净的鸟嘌呤标准样品有区别,所以使用盐酸溶解标样后析出的固体与实验提取的鸟嘌呤作为参照。由图1可以看出,本次实验所提取的鸟嘌呤的红外谱图与溶解后析出的标准鸟嘌呤的谱图基本一致,所以加热搅拌鱼鳞可以作为提取鱼鳞鸟嘌呤的方法。

2。5本章小结来自优I尔Y论S文C网WWw.YoueRw.com 加QQ7520~18766

本章主要进行了鱼鳞中鸟嘌呤提取方法的研究,实验结果表明:鸟嘌呤的提取率为0。8%;经过红外表征并与标准样品进行对比,本试验所得产品是鸟嘌呤,热水搅拌提取法可以作为提取鱼鳞中鸟嘌呤的方法。其中,热水提取时,水温不能超过50℃,当水温高于50℃时鱼鳞中的胶原蛋白也会部分溶解在水中。

第三章 鱼鳞中胶原蛋白的提取

3。1引言

胶原蛋白在动物的骨、腱、韧带、皮肤等部位中广泛存在[4],凭借较好的辅助细胞再生功能、生物相容性、低抗原性等生物特性,其提取制品已被生物医学、食品、美容保健等众多领域广泛使用[17、18]。在生物医学领域,胶原蛋白具有预防心脑血管疾病、改善记忆力、降低人体胆固醇等价值[19];在食品领域,胶原蛋白可以用作包装食品、改良冷冻食品的材料,也可以作为糖果糕点的添加剂[17];在美容保健领域,尤其近几年来非常受人追捧[20],可以增强皮肤中胶原蛋白的活性补充氨基酸以达到保湿除皱的美容功效[8]。胶原由于具有生物活性,所以不溶解于冷水也不溶于热水,不能使用蛋白酶进行分解。但是在酸、碱、酶或者高温的条件下, 胶原的三螺旋结构会发生解体变成3条自由的肽链,并且可以降解成多肽甚至小肽,形成相对分子量比较高的明胶和相对分子量较低的胶原蛋白肽。

胶原和胶原蛋白肽性能的差异,主要是因为结构的改变。胶原分子是一种右手三螺旋结构,是通过氢键、范德华力和共价键交联三股a-肽链构成的。因为这样的超螺旋结构,胶原分子十分稳定,一个胶原分子的相对分子量大约有300KDa。它还有低免疫原性、可降解性和生物相容性等[21]。

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