常见体外抗氧化活性评价方法如总抗氧化能力测定法、超氧阴离子自由基的清除能力测定法、羟基自由基的清除能力测定法和DPPH自由基的清除能力测定法等，本实验重点在研究不同浓度的山萘酚对同种自由基清除能力大小以及不同浓度的山萘酚对相同自由基清除能力大小的相关性进行评价，根据实验结果进行总结和讨论，以期为未来建立抗氧化活性评价法标准体系提供参考。

1。1山萘酚的生物学特性

山萘酚，英文名称为Kaempferol，中文别名四羟基黄酮、百蕊草素Ⅲ、山萘酚-3-山萘黄酮醇,结构式见图1。山萘酚、山萘酚苷和富含山萘酚的植物在体内外均有抗氧化活性。其分子结构中的C2-C3双键与C4上的O形成的共轭结构，以及C3，C5，C7上的酚羟基都是山萘酚发挥抗氧化作用的重要化学结构：山萘酚的C7位羟基还具有很强的酸性，因此山萘酚能与金属离子络合更好的发挥它的抗氧化活性[2]。

图1山萘酚的结构式

目前，山萘酚纯品已经能从小檗科植物窝儿七的根茎、大戟科植物猫眼草的地上部分、檀香科植物白瑞草全草以及豆科植物槐树的果实中提取得到[3-5]。试验中所采用的是从生物科技公司采购的山萘酚纯品。其单体纯品为黄色结晶状粉末，溶于热乙醇、乙醚和碱，几乎不溶于水。山萘酚虽具有很多药理作用但其在水中的溶解度偏小，因此其不能广泛运用于食品开发。抗癌、抑制生育、抗炎、解痉止咳、利胆利尿等是山萘酚的主要药理作用[6-9]，因而受到人们的广泛关注。

1。2山萘酚的抗氧化作用机理论文网

自由基是生物体内生化反应产生的中间产物,是一类可以单独存在的具有高度氧化活性的带有一个或几个不配对电子的分子或原子,其化学性质相当活跃。由各种自由基所引发的氧化作用是导致身体中各组分和器官损伤、病变的重要原因之一[10]。清除体内多余的自由基主要是靠内源性自由基清除系统，可分为非酶促系统和酶促系统两类，两类清除系统相互协同共同完成体内的抗氧化任务[11]。癌症、衰老或其它疾病大都与过量自由基的产生有关联。研究抗氧化可以有效克服其所带来的危害，所以抗氧化被保健品、化妆品企业列为主要的研发方向之一，也是市场最重要的功能性诉求之一。值得注意的是，人体在不可避免地产生自由基的同时，也在自然产生着抵抗自由基的抗氧化物质，以抵消自由基对人体细胞的氧化攻击。人体的抗氧化系统是一个可与免疫系统相比拟的、具有完善和复杂功能的系统，机体抗氧化的能力越强，就越健康，生命也越长。

山萘酚抗氧化作用机理主要包括以下几个方面：①对自由基的直接清除作用。山萘酚在微摩水平清除超氧阴离子、羟基自由基和过氧化物的能力在其抗氧化过程中发挥重要作用。Wang等人评估了几种黄酮的抗氧化活性，发现山萘酚清除Fenton反应产生的羟基自由基的能力最强，LC50为0。5μM[12]。②山萘酚可以通过螯合Fe2+和Cu2+减少羟基自由基的产生和阻止活性氧化酶的活性，达到抗氧化作用的目的。经研究报道，从豹皮樟中提取出槲皮素-3-0-β-D-葡萄糖苷、山萘酚-3-0-β-D-葡萄糖苷和山萘酚三种黄酮类提取物进行了抗氧化活性研究，结果表明，三种化合物均具有明显的抗氧化活性，并呈量效关系，且山萘酚的抗氧化活性最高[13]。③参与自由基反应，阻止自由基的引发，从而阻断自由基的反应链。山萘酚化学结构上的酚羟基能够和活性自由基反应，形成相对稳定的半醌式自由基，自由基的链式反应随之终止[14]。

2材料与方法

2。1材料与仪器