因此,随着人类对槲皮素抗氧化作用了解的深入,寻找有效的自由基清除剂也成为目前医药界研究的热点问题之一。本研究采用FRAP法、邻苯三酚自氧化法、铁氧化邻二氮菲法、DPPH法对槲皮素的抗氧化性能进行评价,并以芦丁为阳性对照,以期认识天然黄酮类物质清除自由基作用的量效关系。

1。1 槲皮素的生物学特性

槲皮素,又名栎精和槲皮黄素,属于黄酮类化合物中的黄酮醇类[5]。分子式为C15H10O7,结构(图1,A)。主要存在于壳斗科植物伊比利亚栎Quercus iberica 皮和叶,小檗科植物红八角莲Dysosma veitchii(Hemsl。 et Wils。) Fu,金丝桃科植物红旱莲Hypericum ascyron L。全草,夹竹桃科植物红麻 Apocynum lancifolium Rus。 叶中。不溶于水,能溶于冷乙醇(1:290),易溶于热乙醇(1:23)。可通过将栎树皮磨成粉末,用热水洗涤,以稀氨水提取后用稀硫酸中和,再煮沸滤液,析出结晶的方法获得。

芦丁是槲皮素的衍生物,又名芸香苷、维生素P等,分子式:C27H30O16,结构(图1,B)。主要存在于烟叶、枣、杏、橙皮、番茄、荞麦花等中。难溶于冷水,可溶于热水、甲醇、乙醇,易溶于碱水。盛建国[6]等用碱提酸沉法可从槐米中提取芦丁等黄酮类成分。

1。2 槲皮素的抗氧化活性机理 

金越[2]等已研究了黄酮类化合物清除自由基的能力,结果表明黄酮类化合物均具有十分强大的自由基清除作用,且呈现明显的剂量依赖性。槲皮素为3,5,7,3´,4´-五羟基黄酮,其分子中2、3位间有双键,37、47位处有2个羟基,故具有能作为金属螯合作用或油脂等氧化过程中产生的游离基团接受体的功能。刘敏[7]等的研究表明槲皮素具有明显的清除 DPPH·自由基、ABTS自由基和抑制脂质过氧化活性,呈浓度依赖效应。牟凤辉[8]等的研究表明槲皮素对·OH、O2-·及DPPH·有不同程度的清除作用。李帅[9]等的研究表明芦丁对DPPH·有较好的清除能力但弱于维生素C。洪军[10]等研究了芦丁对O2-·、·OH有较好的清除作用。

槲皮素的其他疗效:①治疗慢性支气管炎:槲皮素具有较好的止咳、祛痰作用和一定的平喘作用;②预防和治疗心血管疾病:能抑制低密度脂蛋白氧化、减少粘附分子和其他炎症标记物、预防神经元氧化和炎性损伤、使血管舒张,改善血管内皮功能;③预防高血压:减少氧化应激、改善细胞信号转导与基因表达调控;④预防和治疗肿瘤和癌症:能有效地阻止环境中致癌物在人体内的活化、加快致癌物在人体内的降解、促进肿瘤细胞的凋亡。

2 材料与方法

2。1 材料与仪器

槲皮素(上海源叶生物科技有限公司,货号:480-19-3);芦丁(上海源叶生物科技有限公司,货号:480-19-3);TPTZ(Sigma-Aldrich,货号:3682-35-7,美国);HCl(沪式,货号:7647-01-0,中国);FeCl3(恒兴试剂,货号:10025-77-1,中国);醋酸钠(国药,货号:127-09-3,中国);冰醋酸(国药,货号:64-19-7,中国);Tris(Solarbio,货号:T8060,美国,又名三甲醇氨基甲烷或缓血酸铵);邻苯三酚(Kermel,货号:87-66-1,美国,又名焦性没食子粉);无水乙醇(沪式,货号:64-17-5,中国);邻二氮菲(又名1,10-菲啰啉,货号:5144-89-8);FeSO4·7H2O(又名绿矾,货号:7782-63-0);磷酸二氢钠(沪式,CAS号:13472-35-0);磷酸氢二钠(沪式,货号:10039-32-4);DPPH(1,1-二苯基-2-三硝基苯肼,货号:1898-66-4,美国);H2O2

电子天平(Max:200g,上海越平科学仪器有限公司,型号:FA2004B);纯水机(实验室级超纯水机,EFED-T-60A,南京易普达科技发展有限公司);酶标仪(Thermo,型号:Multiskan MK3);移液枪(单道可调移液枪,德国);点样板(MicroAmp,货号:4346906);水浴锅(型号:DZKW-4,北京林茂科技有限公司);电热恒温振荡水槽(上海福玛实验设备有限公司,型号:DKZ-2);容量瓶(10ml﹑25ml、50ml);离心管(1。5ml、5ml);烧杯;玻璃棒

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