（8）在吸附柱中加入350ul Buffer RW1,12000rpm离心20秒，将收集管中的废液倒尽，吸附柱重新放回；

（9）向吸附柱中加入80ul 配置好的DNaseI混合液，室温中放置15分钟；

（10）在吸附柱中加入350ul Buffer RW1，12000rpm离心1分钟，倒掉废液，吸附柱重新放回；

（11）向吸附柱中直接加入500ul Buffer RW2（使用前需要检查是否已经加入无水乙醇），12000rpm离心20秒，倒掉废液，吸附柱重新放回；

（12）重复步骤（12）；

（13）把吸附柱放置在一个新的无RNase的离心管中，向吸附柱的中间部位加入40ul RNase-Free Water，室温下放置1分钟，12000rpm离心1分钟，收集RNA溶液。

2。2。4木聚糖酶基因的克隆

2。2。4。1引物设计

根据设计引物时注意的三个基本原则[21]，设计出理想的引物通过PCR[22]的手段扩增出我们所需要的目的基因，来达到基因克隆的目的。

参照Genebank数据库中查到的里氏木霉Xyn2的基因序列，设计PCR引物[23]。

正向引物：5'-GCCATATGGAATTCGCCAAACCT-3'（华大基因合成）

反向引物：5'-CGCGGATCCATGGTGATGGTGATGGTGAGATCTCCCTTTAG-3'（华大基因合成）