摘要:淀粉突变体是研究水稻淀粉代谢途径的优良材料。淀粉约占水稻胚乳干物质总量的80%,胚乳中淀粉的组分与含量以及颗粒结构决定了稻米品质。探索淀粉代谢机制对于提高淀粉类作物产量和质量有着重要意义。水稻突变体W9142具有胚乳粉质的外观表型,通过聚丙烯酰胺凝胶电泳、标记基因型分析等手段,对该材料进行了初定位与精细定位,以期发掘控制淀粉合成运输相关的新基因,为培育水稻新品种提供帮助;同时对突变体表型和生理生化进行分析,初步探讨W9142突变的分子机理,为深入了解AGPase的作用机制奠定基础。36609 毕业论文关键词:水稻(Oryza sativa L.);突变体;淀粉;粉质胚乳;AGPase
Cloning and Preliminary Analysis of Rice Mutant W9142 Mutant Gene
Abstract:Starch mutant is an excellent material for studying the metabolic pathway of rice starch. Starch accounts for about 80% of the total dry matter content of rice endosperm, and the composition and content of starch in the endosperm and the grain structure determine the quality of rice. Exploring the mechanism of starch metabolism is of great significance to improve the yield and quality of starchy crops [1]. The rice mutant W9142 has the appearance phenotype of endosperm silty. The material is preliminarily positioned and fine-coded by means of polyacrylamide electrophoresis and marker genotyping analysis. In order to explore new genes related to starch synthesis transport, New varieties of rice to help. At the same time, the phenotype and physiology and biochemistry of the mutant were analyzed, and the molecular mechanism of W9142 mutation was discussed, the mechanism of AGPase was discussed [2].
Key words:Rice(Oryza sativa L.); Mutant; starch; powdery endosperm; AGPase
目 录
摘要1
关键词1
Abstract.1
Key words..1
引言1
1材料与方法.2
1.1材料种植 2
1.2 实验方法.2
1.2.1 成熟种子直链淀粉、总淀粉和总蛋白质含量的测定.....2
1.2.2 成熟种子胚乳横截面扫描电镜观察2
1.2.3 W9142的图位克隆2
1.2.4 分子标记多态性筛选及定位分析..3
1.2.5 基因预测和测序..4
1.2.6 AGPase相关基因的表达分析4
1.2.7 蛋白Western-blot分析5
1.2.8 AGPase酶活测定5
2 结论和分析5
2.1 突变体的W9142的表型及农艺性状分析.5
2.1.1野生型和W9142的外观、成熟籽粒的粒型和千粒重的比较5
2.1.2野生型和W9142的直链淀粉含量、总淀粉含量以及总蛋白质含量的测定6
2.2 突变体W9142种子中淀粉颗粒结构异常7
2.3基因定位与图位克隆7
2.4 W9142突变体及野生型中的相关基因表达及酶活分析9
3 讨论12
3.1 OsAGPL2单碱基的突变导致不透明胚乳的产生12
3.2突变体W9142的OsAGPL2突变对AGPase其它基因的影响12
致谢..12参考文献..12
水稻粉质突变体W9142突变基因的克隆和初步分析 水稻(Oryza sativa L.)是世界上最重要的粮食作物之一,因为其高产稳产、适应性强的特点而在全世界范围内被广泛种植。据统计,种植水稻的国家己经达到112个,超过水稻总栽培面积的90%集中在亚洲地区。稻米的品质优于其它粮食,是我国半数以上人口的主食。水稻籽粒中的淀粉含量通常占到精米重量的90%左右,因此,淀粉的含量及组成对于水稻的产量和品质至关重要[1]。植物源组织光合作用的最终产物,经过一系列代谢过程后,以淀粉的形式贮藏在库组织中。淀粉作为主要的储能物质,是植物种子生长发育的主要能量来源。研究水稻淀粉合成的遗传、了解淀粉代谢途径的调控,对于改善淀粉品质、培育优质品种具有重要意义[2]。
胚乳内的淀粉分为直链淀粉和支链淀粉两类,直链淀粉是由葡萄糖α-1,4糖苷键连接而成的多聚糖,支链淀粉是由葡萄糖经α-1,6糖苷键连接而成的多聚糖,两者均在造粉体中合成。淀粉的合成首先是绿色组织通过光合作用合成葡萄糖,然后转化为蔗糖;蔗糖通过文管束运送到籽粒中,蔗糖在尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶(UGPase1)作用下水解为 UDP-葡萄糖和果糖,然后转化为1-磷酸葡萄糖,后者在 ADPGase催化下合成腺苷二磷酸葡萄糖(ADPG),ADPG 在淀粉合成酶(SS)、淀粉分支酶(BE)和淀粉去分支酶(DBE)等作用下合成淀粉。淀粉合成、代谢相关基因的突变多数都会引起淀粉含量或结构的改变。目前已经报道的淀粉相关突变体主要包括垩白、皱缩、糯性、粉质等类型[3]。