1。2。7 微生物的菌种鉴定

用SDS法提取微生物总DNA，通过PCR和DNA测序明确其16SrDNA/18SrDNA的基因序列。真菌18SrDNA扩增引物编号为EF3和EF4，细菌16SrDNA扩增引物编号为1492R和27F。扩增体系的条件为20微升，扩增程序为94℃预变性2min；30s 94℃变性，30s退火时间，1min72℃延伸时间，共计32个循环；72℃最终延伸5min。PCR结束后，将扩增产物用1。0%的琼脂糖凝胶进行电泳检测实验，将检测出目的条带的PCR产物送往上海桑尼生物技术有限公司进行测序，测序结果用BLAST进行相似性分析和同源性比对，通过 MEGA 5。0 软件，采用邻近法（Neighbor-joining）构建系统发育树。