4 讨论 9

参考文献 10

致谢 10

1。引言来自优Y尔L论W文Q网wWw.YouERw.com 加QQ7520~18766

    青霉病是柑橘采后的主要病害，它能引起果实的腐烂，加快毒素积累，减少果实的保存时间并且降低其商品价值，为每年世界各地的水果产业带来非常大的损害。而采后的腐败霉变是危害果蔬的最大“敌人”，也是造成每年世界各地的此类作物产量损失最大的原因之一，并且也给经济带来很大程度的损失，因此控制和治疗是时分必要的。病菌在通过外部环境的改变而生长发育后，最终会导致果实和果肉的大面积感染并且霉变腐败。传统的果蔬采后保藏方法有不少，有常用的喷农药法、零下低温贮藏法、辐照保藏法，还有微生物保藏法等。然而都有各自的非常严重的缺陷：常见的农药大多具有很强的毒性，对人体有害；低温贮藏所需成本较高；辐射有可能造成一些意想不到的突变，而突变大多都是具有有害性的；至于微生物防治的技术手段，也很难在非专业人士之间普及的。因此，寻找一种几乎人人都能用的、低成本的、有害性低的保藏方法对果蔬贮藏有着重大意义。

    硼酸（Boric acid）是一种重要的植物微量营养素，并已被广泛应用于农业上对真菌，细菌和许多昆虫的控制。它是一种非常有潜力的杀菌剂替代品，因为它毒性低，容易获得，便宜而且可以易于控制、操作，是当今果蔬采后病害防治的热点。它的化学式为H₃BO₃，为一种一元弱酸，在常温下一般以白色粉末或者无色晶体的状态存在，能溶解于水和各种有机溶剂中，且本身并无太大显著气味，取少量样本尝起来味道微酸苦后带甜。硼酸的酸性很弱，甚至比可乐中含有的碳酸酸性更弱，如果在实验室里皮肤一不小心被强碱所腐蚀，最常用的处理方法就是用大量的水冲洗后涂上饱和硼酸溶液中和掉碱。由它的饱和溶液可以直接涂在皮肤上这一点可见，硼酸的腐蚀性也是很弱的。经过查询，成人口服硼酸的最低致死量约为640mg/kg，而砒霜仅需0。1g左右即可致一个成年人于死地。硼酸溶于水后会随着水蒸气一起挥发，国家标准规定硼酸空气中最高容许浓度为10mg/m³，而令人们忌惮万分的甲醛在空气中最高容许浓度为0。08mg/m³，仅为硼酸的1/125。通过这两项数据对比，我们可以认为，使用少量较低浓度的硼酸用于果蔬贮藏上是安全的，不会有太大危险。论文网

    本实验旨在通过超微结构分析、生理、生化指标（孢子萌发率、芽管伸长速度、菌落扩展速度、生物积累量、苹果活体接种发病率及病斑直径等）测定，确定硼酸处理对Penicillium expansum生长发育及致病力的影响；进而初步阐明硼酸的抑菌机制。

2 材料与方法

2。1菌株及主要试剂

    硼酸，病原菌Penicillium expansum，光学显微镜，马铃薯葡萄糖（PDA）培养基、马铃薯葡萄糖肉汤（PDB）培养基若干个，当地购买的长势相似、发育程度没有太大区别且没有明显机械损伤的新鲜苹果若干个。

2。2 硼酸最低抑菌浓度的确定及对Penicillium expansum芽管伸长的影响

    收集已经在PDA培养基上正常培养了两周的Penicillium expansum孢子，分别等量加入到4个含有100 mL PDB培养基的250 mL三角瓶中，借助血细胞计数仪调节孢子终浓度为1。0×106spores/mL，分别加入终浓度为0，0。15%,0。30%、0。45%的硼酸，（硼酸浓度为0的一组为对照组）并在25 ℃、200 r/min的条件下于摇床上振荡培养。接着分别在培养后6-12小时内，使用光学显微镜观察并统计每个组的孢子萌发率，然后再确认最低抑菌浓度（Minimum inhibitory concentration，MIC）。本次实验所确定的最低抑菌浓度指的是在相同培养时间内，空白组孢子萌发率≥90%时，处理组孢子萌发率≤10%时的抑菌物质浓度。并且分别在培养厚8-16小时内分别最低抑菌浓度的硼酸处理过的Penicillium expansum芽管的长度和对照组的芽管的长度。每种处理随机统计100个孢子的萌发率及芽管长度，重复三次，整个实验重复两次。