1。3。4 10%甲醛溶液（称取甲醛100 g加去离子水至1000ml，室温保存）；

1。3。5 0。1%多聚赖氨酸溶液（多聚赖氨酸1 ml加去离子水定容至10 ml，-20 ℃保存）；

1。3。6 枸橼酸钠缓冲液（称取枸橼酸钠缓冲液1包，加去离子水定容至2000 ml，4℃保存）；

1。3。7 TBST1×缓冲液（取一定量TBST10×缓冲液，用去离子水稀释10倍，4℃保存）；

1。3。8 5%BSA封闭液（称取BSA0。25 g，加TBST1×缓冲液定容至5 ml，4 ℃可保存数天）； 

1。3。9 Anti-iba1抗体溶液(Anti-iba1抗体1μl加5%BSA 99 μl，4℃ 保存，短期可回收使用)； 

1。3。10 70%乙醇溶液（取无水乙醇140 ml，加去离子水至200 ml）；

1。3。11 75%乙醇溶液（取无水乙醇150 ml，加去离子水至200 ml）；

1。3。12 80%乙醇溶液（取无水乙醇160 ml，加去离子水至200 ml）；

1。3。13 85%乙醇溶液（取无水乙醇170 ml，加去离子水至200 ml）；

1。3。14 90%乙醇溶液（取无水乙醇180 ml，加去离子水至200 ml）；

1。3。15 95%乙醇溶液（取无水乙醇190 ml，加去离子水至200 ml）。

1。4实验器材论文网

超纯水仪（Direct-Q3，美国Millipore公司）；显微镜载玻片（上海好迪实业有限公司）；电热烘箱（DNP-9022，上海精宏实验设备有限公司）；58℃~60℃切片石蜡（上海华灵康复机械厂）；石蜡切片机（RM2235，德国Leica公司）；漂片仪（HI1210，德国Leica公司）；烤片仪（HI1210，德国Leica公司）；电子天平（AL104，上海Metter Toledo仪器有限公司）；Mettler Toledo酸度计(上海捷辰仪器有限公司)；台式恒温振荡器（THZ-D，苏州市培英实验设备有限公司）；高压锅（苏泊尔）；密封式恒温可调电加热器（浙江省嘉兴市凤桥电热器厂）；小烧杯（上海好迪实业有限公司）；免疫组化湿盒（常州市飞勒斯仪器有限公司）；微量离心管（eppendorf，EP）；不同规格的移液枪（北京大龙兴创实验仪器有限公司）；显微镜（YS100，日本Nikon公司）。

2。实验方法

2。1 动物模型建立

成年SD大鼠，随机分组, 分别为对照组和脂多糖组。大鼠自由进食和饮水，12小时明暗循环，室温22～25℃。大鼠垫料及时更换，保持各组大鼠的生长环境保持一致，排除环境因素对实验的干扰。脂多糖组腹腔注射脂多糖2。5 mg/kg*7d；对照组给与等量的生理盐水。以上两组分别于最后一次给药后24小时麻醉后处死。

2。2 脑组织获取

到对应时间取脑时，大鼠腹腔注射10%水合氯醛（0。35 ml/100 g)将其麻醉。麻醉完全后，将大鼠前肢固定于蛙板上，暴露胸腔，从右心房沿右心室进针抽取全血，采血的针头、注射器和EP管都需要清洁干燥，无异物。大鼠麻醉处死后，立即取出脑。用刀片在前囟点后1 mm冠状面切开，矢状面再切开，得到想要的脑组织区域。

2。3 石蜡包埋

2。3。1 切割：将取出的大鼠大脑前面部分没纹状体切去2 mm，后面部分同样切去2 mm。2。3。2 固定：将大鼠大脑移入10%甲醛溶液中固定2天。

2。3。3 脱水：将大鼠大脑移入75%乙醇溶液中浸泡过夜；第二天，将其移入85%乙醇溶液中浸泡2小时后，再移入95%乙醇溶液中浸泡2小时，之后移入100%乙醇溶液中浸泡1小时，最后换新的100%乙醇浸泡1小时。保持组织脱水时乙醇溶液梯度的纯度，不回收使用。脱水完全的标志是观察到脑组织变成白色。

2。3。4 透明：将脱水完全的脑组织移入二甲苯溶液中浸泡透明，约2-3小时。二甲苯透明时间不宜过长，琥珀色为宜，透明太长容易使组织易碎，影响切片。透明完全的标志是观察到二甲苯完全进入脑组织，脑组织变得透明。