摘 要

  背景 基础水平的心肌组织自噬有利于保护心肌，膳食蛋氨酸水平可能影响心肌转录因子TFEB调控的自噬相关基因的表达。目的 研究膳食蛋氨酸限制（MR）对心肌组织转录因子TFEB靶基因的影响，进一步探索膳食蛋氨酸限制延缓衰老的分子机制。 方法 采用正常浓度蛋氨酸饲料（0。85% w/w）和以低浓度蛋氨酸饲料（0。17% w/w）喂养12周的雄性C57BL/6 小鼠为实验对象，提取心肌组织RNA、逆转录、定量PCR检测TFEB靶基因，如CTSB、LAMP1、MAPLC3B、SQSTM1、TFEB等的表达，分析膳食蛋氨酸限制对小鼠心肌组织自噬的影响。 结果 蛋氨酸限制组与正常蛋氨酸组相比，CTSB、SQSTM1的mRNA表达量有显著性升高（P＜0。05）；MAP1LC3B、TFEB的mRNA表达量有增强的趋势，但没有统计学差异（P>0。05）。 结论 膳食蛋氨酸限制可使心肌组织TFEB靶基因mRNA表达水平增强，提示膳食蛋氨酸限制可能通过转录水平诱导心肌组织自噬。85106

毕业论文关键词：蛋氨酸限制； 心肌组织； 自噬； 转录因子TFEB

Abstract

Background Basic level of autophagy is beneficial to myocardium，the level of dietary methionine may influence the expression of transcription factor TFEB in myocardial tissue。  Objective To investigate the effects of Methionine restriction to the expression of TFEB in myocardial tissue,and provide theoretical basis for myocardial aging mechanism in further exploration。  Methods By extract the mRNA, reverse transcription, RT-PCR, the autophagic and TFEB changes in male C57BL /6 normal concentration of methionine( 0。85% ) and low concentration of methionine (0。17% ) feeding for 12 weeks were analyzed。  Results Compared with normal diet group,CTSB and SQSTM1 mRNA expression has significant difference in methionine restriction group (P < 0。05)。 MAP1LC3B and TFEB mRNA expression has a tendency to strengthen on scatter plot,but do not have significant difference。 (P >0。05)。 Conclusion This study found that methionine restriction can enhance the expression of TFEB。 Dietary methionine restriction can affect myocardial autophagy through gene transcription。 

Key words: methionine restriction; myocardial tissue; autophagy; transcription factor TFEB

目 录

1 引言 4

2 材料与方法 5

2。1主要试剂 5

2。2主要仪器 5

2。3方法 5

2。3。1 组织来源 5

2。3。2 RT-PCR测定心肌组织中TFEB相关靶基因的表达 6

2。3。3 引物序列 8

2。3。4 统计学方法 9

3 结果 9

3。1蛋氨酸限制对小鼠体重的影响 9

3。2 RNA定量检测结果 11

3。3 PCR结果 12

4 讨论 15

4。1实验的重复性 15

4。2蛋氨酸限制通过降低体重源Q于W优H尔J论K文M网WwW.youeRw.com 原文+QQ75201.,8766 对心脏功能的可能影响 16

4。3 TFEB相关转录表达在蛋氨酸限制诱导自噬中的作用 16

5 结论 17

参考文献 18

致  谢 19

1 引言