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2。2 实验方法
2。2。1 最大吸收波长及标准曲线的绘制
2。2。1。1 浓度为0。1mol/L的氢氧化钠的配制
称取1g氢氧化钠固体倒入小烧杯中,加入少量蒸馏水搅拌均匀,使其溶解,将溶液倒入250mL的容量瓶中,加入蒸馏水至容量瓶的2/3,盖上瓶塞充分震荡摇匀,再加入蒸馏水定容到250mL,再次震荡摇匀,即得。来*自-优=尔,论:文+网www.youerw.com
2。2。1。2 最大吸收波长的选择
精密称取5mg血卟啉,放入小烧杯中,加入少量0。1mol/L的NaOH溶液使其溶解并移至50mL容量瓶中,再用0。1 mol/L的NaOH溶液稀释至刻度,在超声仪上震动摇匀,即得血卟啉标准溶液。
打开紫外分光光度计,以0。1mol/L氢氧化钠溶液为空白样,校准后,在200nm~400nm波长处进行紫外吸光度扫描,测得其在λ = 391nm处有最大吸收。再称取5mg的β-环糊精,羟丙基-β-环糊精进行同法操作,在该波长处没有吸收,故以波长λ = 391nm为血卟啉的测定波长。
2。2。1。3 标准曲线的绘制
将上述血卟啉标准溶液用5mL的移液管分别精密吸取1mL,2mL,3mL,4mL,5mL,并置于5个50mL的容量瓶中,用0。1mol/L氢氧化钠溶液定容至刻度,同样放在超声清洗仪中震荡,混合均匀,得到浓度为2μg/mL,4μg/mL,6μg/mL,8μg/mL,10μg/mL的标准液,将这5个50mL的容量瓶分别进行1~5编号,作为待测液。