2。1。1 甘精胰岛素样品1

称取20 mg甘精胰岛素样品，加500 ul 0。01 mol/L的HCL溶解，10000 g离心5 min，取上清备用。

2。1。2 甘精胰岛素样品2

称取1 g甘精胰岛素样品，加100 ml双蒸水，并加微量醋酸助溶，等完全溶解后，用真空冻干机进行冻干。称取冻干处理后的甘精胰岛素样品20 mg，溶于500 ul 双蒸水中，10000 g离心5 min，取上清备用。

2。1。3 甘精胰岛素样品3

称取1 g甘精胰岛素样品，加100 ml双蒸水，并加微量醋酸助溶，等完全溶解后，用真空冻干机进行冻干。称取冻干处理后的甘精胰岛素样品20 mg，溶于500 ul 上样缓冲液中，10000 g离心5 min，取上清备用。

2。1。4 甘精胰岛素标准品

称取1 g甘精胰岛素标准品，加100 ml双蒸水，并加微量醋酸助溶，等完全溶解后，用真空冻干机进行冻干。称取冻干处理的甘精胰岛素标准品20 mg，溶于500 ul上样缓冲液中，10000 g离心5 min，取上清备用。

2。2 主要设备

电泳仪（Multi-phorII）、循环水浴（MultiTempIII）、灌胶模（GE Healthcare）、凝胶支持膜（Gel Bond PAG film）、全波长紫外可见光扫描仪（UMAX PowerLook 2100XL）、冻干机（Creatrust）、离心机（TGL-16C）

2。3 主要试剂

单丙烯酰胺（ACR）、亚甲基双丙烯酰胺（Bis）、N,N,N’,N’-四甲基乙二胺（TEMED）、过硫酸铵（AP）、两性电解质（pH3。0-10。0，GE-Healthcare Life Sciences）、等电点标准蛋白（pI Marker，英国Amersham Biosciences，pH 3-10）、三氯乙酸（TCA）、考马斯亮蓝R250、甲醇（Methanol）、冰醋酸（GAA）、牛血清白蛋白（BSA）

2。4 试剂配置来*自~优|尔^论:文+网www.youerw.com +QQ752018766*

A液：称取单丙烯酰胺29。1 g、亚甲基双丙烯酰胺0。9 g，加适量双蒸水溶解，并稀释至 100 ml，双层滤纸过滤，棕色瓶中避光保存备用。

B液(10 %过硫酸铵溶液)：称取100 mg过硫酸铵，加1 ml双蒸水溶解（需临用前配置）。

0。1 % BSA:称取5 mg BSA，溶于5 ml双蒸水，备用。

上样缓冲液（2倍浓度）：量取 pH 3。0-10。0的载体两性电解质200 ul，甘油3 ml，双蒸水1。8 ml，充分混匀后备用。 

正极液（1 mol/L磷酸溶液）：原磷酸试剂的浓度约为16 mol/L，故配制时用水稀释16倍即可。

负极液（1 mol/L氢氧化钠溶液）：称取氢氧化钠4 g，加适量双蒸水溶解，并稀释至100 ml。 

固定液：称取三氯乙酸34。5 g、磺基水杨酸10。4 g，加适量双蒸水溶解，并稀释至300 ml。

染色液：称取考马斯亮蓝R250 0。35 g，加脱色液300 ml，在60-70 ℃水浴中加热，使溶解即得。

脱色液：量取95 %甲醇450 ml、冰醋酸100 ml，加双蒸水稀释至1000 ml。

保存液：量取甘油30 ml，加脱色液300 ml，混匀备用。