蔗糖处理对玉米幼叶花青素合成的影响(2)
由于花青素的不稳定因此提取是分离、纯化和利用花青素的关键步骤，其主要的提取方法有本文来自优尔/文(论"文?网，毕业论文 www.youerw.com 加7位QQ324~9114找原文：1.溶液提取法；2.加压溶剂萃取；3.超高压辅助提取；4.微波辅助提取；5.超声波辅助提取；6.高压脉冲电场辅助提取等[3]。溶液提取法是提取花青素的常规方法。多用甲醇、乙醇、丙酮、水或者混合溶剂等。因为要防止提取过程中非酰基化的花青素分解，会在提取液中加入一定浓度的盐酸或甲酸，但这些酸在提取的过程中可能会导致酰基化的花青素部分或全部水解[4]。而且这种提取花青素的方法时间长，提取的效率低，往往会使花青素降解及生理活性降低[4]。但限于实验室条件，还是采用的这种传统方法。
花青素主要的分离纯化方法有结晶法等物理方法；纸层析法、薄层层析、柱层析、高效液相、电泳法等化学方法；膜分离等生物方法[3]。
当前天然色素食品消费需求不断增加。天然色素中的主要成分大多是食物中的固有成分，并具有一定的营养价值和生理保健作用。如其中的代表性成分花青素苷有较强的抗氧化的作用，清除人体内的大多数自由基；降低一些氧化酶活性；降低有高血脂老鼠的甘油脂水，有效改善高甘油脂、脂蛋白的代谢分解；抑制胆固醇的吸收，降低那些低密度的脂蛋白、胆固醇含量；抗变异和抗肿瘤和抗过敏和保护胃粘膜的多种功能[6-9]。
玉米作为中国三大农作物，研究玉米可以有效的造福于社会。目前对玉米花青素的研究处于起步阶段，还没有可以借鉴的关于对玉米幼苗花青素合成影响比较成熟的技术体系。本实验以玉米为实验材料，采用水培法培养玉米，研究不同蔗糖浓度对玉米幼叶花青素合成的影响，从而为提高植物中花青素含量提供实验依据[10-16]。利用不同浓度梯度的蔗糖[15-18]以及其它的还原糖葡萄糖和果糖来处理玉米幼苗2-3天[14-18]，通过测量花青素含量，以及与花青素含量有关的其它生理指标如叶绿素含量、可溶性糖的含量[13]、丙二醛(MalondialDehyde,MDA)的含量、超氧化物歧化酶（SuperoxideDismutase，SOD）[10-16]的含量及从宏观上分析黑玉米和普通玉米的区别来进行实验研究。各生理指标的测定均是通过研磨提取，然后通过分光光度计来测量其在不同波长的吸光度[10-18]。
为了研究蔗糖浓度对玉米幼叶花青素合成的影响在玉米幼苗时分别采用4个浓度梯度（20、40、60、80mmg/L）的蔗糖对玉米幼苗进行处理。本实验不能确定蔗糖本身还是其代谢产物果糖或葡萄糖、又或是蔗糖溶液本身的浓度差对其造成的影响。在设定20mmg/L的果糖和20mmg/L的葡萄糖组合，20mmg/L的果糖、20mmg/L的葡萄糖和20mmg/L蔗糖溶液处理，共优尔个处理组，加上对照组共七组。在处理三天后测定玉米幼苗的一些生理指标（花青素的含量、及其他与花青素相关的可溶性糖的含量、叶绿素的含量、MDA的活性、SOD的活性。然后对实验数据进行分析处理得出结论。
1.实验部分
1.1材料
1.1.1植物材料
挑选出籽粒饱满的玉米种子，丹科七号和黑玉米一号，此两种种子均有周口农科院提供。
1.1.2 所需试剂及配法