蔗糖处理对玉米幼叶花青素合成的影响(3)
试剂：蔗糖溶液、果糖溶液、葡萄糖溶液、20%三氯乙酸（TCA三氯醋酸）、2.5%硫代巴比妥酸(TBA)溶液、乙醇、中性醋酸铅、草酸钠、硫酸、丙酮、EDTA、蒽酮、CaCO₃、石英砂、0.1mol/L HCL、100μmol/lEDTA-Na2溶液、20μmol/l核黄素溶液、750mmol/l氮蓝四唑、130mmol/l蛋氨酸、0.05mol/l磷酸缓冲液（PH7.8）[17-22]。
相关配法：（1）测定可溶性糖含量（蒽酮法）需用试剂：
乙醚、草酸钠粉末、饱和中性醋酸铅；
1g/l的蒽酮试剂：称取1g经过纯化的蒽酮，用稀硫酸溶液（由760ml比重为1.84的浓硫酸加到300ml水中）溶解并定容至1000ml。测定时新鲜配制。
200mg/l葡萄糖标准溶液：称取已在80℃烘箱中烘至恒重的葡萄糖100mg用蒸馏水溶解并定容至500ml，即得200mg/l葡萄糖标准溶液。此液放入冰箱中保存，使用前一个小时取出回升至室温。
（2）测定花青素、叶绿素含量需用的试剂：
1％酸化乙醇、氯仿
（3）测定丙二醛含量需用的试剂：
20％三氯乙酸（TCA三氯乙酸）；
0.5％硫代巴比妥酸：0.25g的硫代巴比妥酸粉加入到20g的酸氯乙酸中定容至100ml;
三氯乙酸（20％）：20g定容到100ml为20％。
（4）测定SOD超氧化物歧化酶含量需用的试剂：
0.05mol/l磷酸缓冲液（PH7.8）；
130mmol/l蛋氨酸溶液：称1.9399g蛋氨酸用磷酸缓冲液定容至100ml;
750mmol/l氮蓝四唑溶液：称取0.06133g氮蓝四唑用磷酸缓冲液定容至100ml，避光保存；
100μmol/lEDTA-Na2溶液：称取0.03721gEDTA-Na2，用磷酸缓冲液定容至1000ml;
20μmol/l核黄素溶液：称取0.0753g核黄素用蒸馏水定容到1000ml避光保存。
1.1.3实验所用仪器
实验所用仪器：紫外分光光度计、电子天平(梅特勒)、电炉、恒温水浴箱(予华)、烧杯、容量瓶、移液管、试管、漏斗、滤纸、研钵、刻度试管、离心机（上海一恒）、恒温箱（迪曼德）、剪刀、擦镜纸、量筒、滴管、移液枪、试管架、棕色容量瓶、记号笔、培养皿、分光光度计。
2.2 方法
2.2.1玉米幼苗的培养
挑选出籽粒饱满的玉米种子（如果不是当年的种子需在4℃条件下破除休眠，需24小时）用蒸馏水冲洗三次。将种子用75％的酒精溶液浸泡10min，[29]然后用蒸馏水冲洗三次（每次一分钟，目的是除去玉米种子上残留的酒精），冲洗后再用蒸馏水浸泡45-60min。浸泡过后将种子分装在培养皿中（在培养皿底部垫一层滤纸），每个培养皿用保鲜膜包起来以防止水分蒸发过快[30]。玉米属于长日照植物，培养时应放在白天13小时晚上11小时25℃的培养箱中进行培养，在玉米发芽期间每天进行加水换水以保证玉米快速成长至幼苗。待其长到三叶期时对其用不同浓度糖溶液处理：
表1不同浓度蔗糖处理玉米幼苗
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处理条件 玉米 |
普通玉米 丹科七号 |
黑玉米 51508 |
| 处理一 | 蒸馏水 | 蒸馏水 |
| 处理二 | 20mmol/l蔗糖 | 20mmol/l蔗糖 |
| 处理三 | 40mmol/l蔗糖 | 40mmol/l蔗糖 |
| 处理四 | 60mmol/l蔗糖 | 60mmol/l蔗糖 |
| 处理五 | 80mmol/l蔗糖 | 80mmol/l蔗糖 |
| 处理优尔 | 20mmol/l果糖+20mmol/l葡萄糖 | 20mmol/l果糖+20mmol/l葡萄糖 |
| 处理七 | 20mmol/l果糖+20mmol/ll葡萄糖+20mmol/l蔗糖 | 20mmol/l果糖+20mmol/l葡萄糖+20mmol/l蔗糖 |