2。4。2羟基自由基清除率的测定

配制样品提取液以及2mmol/L的硫酸亚铁、2mmol/L 的过氧化氢溶液和6mmol/L的水杨酸乙醇溶液。在试管中依次加入1mL的样品溶液，1mmol/L的硫酸亚铁、1mL2mmol/L的过氧化氢溶液和1mL6mmol/L的水杨酸，充分混合均匀，再添加 5mL 蒸馏水，振荡混合，然后置于 37℃的水浴锅中反应，时间30min。通过分光光度计测定510nm 波长处反应后的吸光值。羟基自由基清除率计算公式如下式所示，

G（%）=[B0-（B1-B2）]/B0*100

其中，B0为空白对照溶液的吸光度，B1为样品溶液的吸光度，B2为未添加过氧化氢溶液的吸光度。

2。4。3还原能力的测定

用移液枪准确取2。5mL样品溶液溶液加入到试管中，然后先添加2。5m L 0。2mol/L pH6。6的H3PO4缓冲液，再添加2。5mL1%的K3Fe(CN)6溶液后混匀。置于 50℃的水浴中进行反应，时间20min，然后再加入 2。5mL10%的C2HCl3O2溶液，混和均匀后在离心机中离心，转速3000 r/min，离心时间10min。取离心后的上清液5mL加入已添加0。5mL 0。1%的FeCl3溶液和4mL蒸馏水的试管中，混和均匀。静置 10min后于700nm处测定其吸光度。观察吸光度的大小来评价还原力的大小。

2。5 蚕白中抗氧化活性物质含量的测定

2。5。1 总多酚含量的测定文献综述

标准曲线的绘制：准确称取1 mg没食子酸粉末，用蒸馏水溶解并定容至10 mL，得到浓度为100 ug/mL没食子酸标准溶液。分别精确移取0 mL、0。05 mL、0。1 mL、0。2 mL、0。4 mL、0。8 mL没食子酸标准溶液于10 mL容量瓶中，再分别加入0。5 mL的福林酚试剂，摇匀静置30 s后分别加入1 mL 12%的Na2C03溶液，摇匀定容至10 mL，在25℃下避光放置2 h，以0样为空白，在760 nm波长处测量其吸光值A。测得其标准曲线为Y=0。0961X+0。0139（R2=0。9993），其中X为没食子酸浓度（ug/mL），Y为吸光度值。由图2。1可知，标准曲线图的相关性较好。

图2。1 没食子酸标准曲线

样品提取方法同2。3。2。

样品测定：精确移取0。5 mL各待测样品溶液于10 mL容量瓶中，按照试验步骤依次加入其它试剂，在760 nm处测量吸光度。按下式计算样品总酚含量：

   X=                                         

其中：X为总多酚含量（mg/g），以没食子酸计；C为根据吸光度得到的样品总多酚浓度（ug/mL）；m为处理样品的质量，这里为0。2 g；V为测吸光度时所稀释的容量瓶体积，这里为10 mL；V1为样品处理液的总体积，这里为25 mL；V2为测定时吸取样品处理液的体积，这里为0。5 mL。 

2。5。2总黄酮含量的测定

标准曲线绘制：精密称取芦丁标准品5。0 mg，用70%乙醇定容到10 mL容量瓶，配成0。5 mg/mL芦丁标准溶液。分别精确移取0 mL、0。2 mL、0。4 mL、0。6 mL、0。8 mL、1 mL、1。8 mL、2 mL芦丁标准溶液于10 mL容量瓶中，加5%的亚硝酸钠0。5 mL，混匀，放置6 min，再加10%的硝酸铝0。5 mL，混匀，放置6 min。加入4%的氢氧化钠4 mL，最后加70%的乙醇至刻度线，静置15 min后，以0样为空白，在510 nm处测其吸光度值A。测得其标准曲线为Y=12。721X-0。0269（R2=0。9997），其中X为芦丁浓度（mg/mL），Y为吸光度值A。由图2。2可知，标准曲线图的相关性较好。