图1 黑色素的形成过程
(四)酪氨酸酶抑制剂的作用机理
    目前,国内外对酪氨酸酶抑制剂的抑制机理[10]普遍认为包括:a 清除氧自由基,终止自由基链的引发,削弱酪氨酸的供氧作用,削弱酪氨酸酶作用。b 酪氨酸酶抑制剂结构与底物相似,作为酪氨酸酶的竞争性底物,从而削弱酪氨酸酶对酪氨酸及其系列氧化产物的催化氧化作用。c 酪合酪氨酸酶中的铜离子,影响酶活力。d 作为强抗氧化剂拮抗氧对酪氨酸酶的激活。也有学者提出,是通过调节酪氨酸酶的糖基部分或与表达酪氨酸酶活性有关的蛋白质的活性。另外,还有学者[20]认为是以反义寡核苷酸的方式抑制酪氨酸酶的产生。[18]
    根据抑制剂与酶作用后是否引起酶永久性失活,可将酶抑制剂分为不可逆抑制与可逆抑制。阚健全等将酪氨酸酶的可逆抑制又分为竞争性抑制、非竞争性抑制、混合型抑制及缓慢结合型抑制,并将这些抑制类型的抑制机理归纳为:竞争性抑制的主要机理为底物类似物结合酶的活性中心抑制酶活性;非竞争性的主要机理为抑制剂与酶活性中心以外的氨基酸残基结合及抑制剂对氧自由基的清除作用;混合型的主要机理为抑制剂对酶活性中心的内源桥基的影响;缓慢结合型抑制的主要机理为抑制剂与酶快速形成复合物,再经历一个缓慢的可逆异构化过程。[12]
    玉竹含有甾体皂甙、黄酮及其糖苷、微量元素、氨基酸、文生素A样物质等,具有抑制酪氨酸酶活性,抑制黑素生成抗氧化等效果。[15]
另外玉竹提取液和白菊花具有良好的协同美白作用,兼具两种植物的功效,具有抗菌、抗炎、抗衰老、促进免疫、清除体内自由基、抗氧化等效果。[13]
    玉竹提取液的美白机理:抑制酪氨酸酶活性,减少黑色素的形成。
2.2.6 玉竹提取液O/W乳液的保湿和肤感测试
(一)测试原理
    此方法采用电容法测量人体皮肤角质层的水分含量,其原理是基于水和其他物质的介电常数差异显著,按照皮肤含水量的不同,测得的皮肤的电容值不同,其观测参数可代表皮肤水分值。
(二)实验条件和志愿者要求
    测试环境条件:测试环境温度为22℃±1℃,湿度50%±5%,并且进行实时动态监测,志愿者要求:有效志愿者至少20人;年龄在20岁~30岁之间;前臂测试区域电容法皮肤水分测定仪的基础值在20岁~30之间;无严重系统疾病无免疫缺陷或自身免疫性疾病者;无活动性过敏性疾病者;既往对护肤类化妆品无严重过敏史者;近个月内未曾使用激素类药物及免疫抑制剂者;未参加其他临床试验者;按规定使用受试物且资料齐全;测试前所有志愿者应填写知情同意书。
(三)测试前准备
    受试部位前不能使用任何产品 (化妆品或外用药品) 试验前,受试者需要清洁双手前臂内测,用干的面巾纸擦拭干净清洁后,在受试者双手前臂内测做好测量区域标记正式测试前,应该在符合标准的房间内静坐至少30min ,不能喝水,前臂暴露,呈测试状态放置,保持放松。
(四)测试步骤
    实验中,左右手臂内侧标记3CM×3CM 试验区域,同一手臂可同时标记多个区域,区域间隔1CM测试产品和空白对照均随机分布在左右手臂上使用电容法皮肤测定仪进行受试区域和对照区域的测量,每个区域依照平行测定5次先测量各测试区域的空白值,然后按2mg±0.1mg 样品/cm2 的用量,使用乳胶指套将试验产品均匀涂布于试验区内涂抹后,分别测量1h、2h 和6h 时,受试区域和空白对照区域的皮肤含水量 (验证时按此时间测定,具体描述以后讨论) 同一个志愿者的测试由同一个测量人员完成。
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